SRB 介绍
磺酰罗丹明 B(Sulforhodamine B,SRB)是一种粉红色的阴离子染料,在细胞生物学研究中被广泛用于细胞增殖和细胞毒性的检测。SRB 可以与细胞内的蛋白质结合,形成稳定的复合物,其颜色强度与细胞内的蛋白质含量成正比。
技术原理
蛋白质结合:SRB 能够与细胞内的碱性氨基酸残基结合,特别是与精氨酸、赖氨酸和组氨酸等残基结合。这种结合是相对稳定的,并且在酸性条件下不易解离。
颜色强度与蛋白质含量的关系:SRB 与细胞内蛋白质结合后,形成的复合物在特定波长下具有较高的吸光度。吸光度的大小与细胞内的蛋白质含量成正比,因此可以通过测量吸光度来间接反映细胞的数量或生物量。
运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存,2年有效。
使用方法
1. 取出细胞,弃去培养液;
2. 小心加入固定液,每孔100 µL,4℃孵育1 h,弃去固定液;
3. 加入清洗液1,每孔100 µL,室温下静置30 s,弃去清洗液1,重复该步骤;
4. 加入染色液,每孔50 µL,室温下避光孵育15 min,弃去染色液;
5. 加入清洗液2,每孔100 µL,弃去清洗液2(该步骤需快速完成,以免染色漏出胞外),重复该步骤5-10次,直至把多染料洗尽为止;
6. 加入溶解液,每孔100 µL,室温下避光孵育5 min;
7. 于515 nm波长检测其吸光值。
相关问题
Q:SRB染色是否会影响细胞的活性?
A:SRB染色本身通常不会对细胞的活性产生明显影响。但是,在固定和染色过程中,要注意使用适当的条件,避免对细胞造成过度损伤。
Q:SRB染色与MTT法、CCK-8法等如何选择?
A:MTS、CCK8及SRB法等都是用来检测细胞代谢活性的方法,可根据实验要求和预算进行选择。
Q:如何处理 SRB 染色后的废液?
A:SRB 染色后的废液含有酸性和有毒物质,应按照实验室的规定进行妥善处理。一般来说,可以将废液收集在特定的容器中,经过中和和处理后再排放。
相关产品
产品名称 |
产品货号 |
规格 |
SRB Cell Proliferation and cytotoxicity assay kit |
40205ES76 |
500T |
40203ES60/76/80/88/92 |
100T/500T/1000T/3×1000T/10×1000T |
|
ATP Luminescent Cell Viability Assay Kit |
40210ES10/60/80 |
10mL/100mL/10×100mL |
40209ES76 |
500T |
|
40206ES76/80 |
500T/1000T |
|
40202ES76/80/92 |
500T(5ml)/1000T(10ml)/10000T(100ml) |
|
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit |
40714ES76/80 |
500T/1000T |
40715ES25 |
25mg |
|
40719ES50/60 |
1×50μg/2×50μg |
|
CellTracker Green CMFDA (5-Chloromethylfluorescein Diacetate) 活细胞示踪剂CMFDA(绿色) |
40721ES50/60/72 |
1×50μg/2×50μg/5×50μg |