当细胞遇到支原体?别怕,这样解决,支原体无影踪-技术前沿-资讯-生物在线

当细胞遇到支原体?别怕,这样解决,支原体无影踪

作者:上海启达生物科技有限公司 2024-05-31T00:00 (访问量:28211)

支原体(PPLO)是一种小的(0.2–0.3微米)无壁细菌,可以在哺乳动物细胞培养物中生长到非常高的浓度,通常为107–108个生物体/ml,而通过常规光学显微镜仍无法观察到。使用电镜可以观察到,(如下图)尽管晚期支原体污染会导致细胞培养基变酸性,但除下文所述外,通常没有明显的迹象表明培养物受到污染。

支原体放大后:

哺乳动物细胞培养物的特征:在污染的早期阶段,支原体通常不会引起培养基的pH值变化,也不会对哺乳动物细胞产生显著的毒性影响。支原体的生长主要与哺乳动物的细胞膜有关。在许多情况下,没有支原体污染的迹象,然而,支原体可引起细胞生长特性的变化、细胞代谢的抑制、核酸合成的破坏、染色体畸变、细胞膜抗原性的变化,并可改变转染率和病毒可接受性。

确认支原体污染的唯一方法是使用特殊技术进行常规检测,操作流程如下图:

培养物中的典型感染途径:在大多数情况下,支原体污染是通过未经测试的感染细胞与其他细胞系的交叉污染发生的。当一次有一个以上的细胞系感染时,或者当同一瓶培养基用于一个以上细胞系时,该污染通常是通过在移液过程中的空气中的微观雾化或在常规处理过程中的培养基开始转移到其他细胞上。

最好的预防措施是良好的无菌技术与常规检测相结合。在一天或一周的工作中,为了处理培养物,要尽量做到“从干净到脏”。也就是说,首先处理已确认的未受污染的细胞,其次处理未知或未经测试的细胞,最后处理怀疑或已知受污染但因特殊原因必须留在实验室的细胞。

抗生素:细胞培养中使用的大多数常规抗生素对支原体无效。硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素和酒石酸泰乐菌素在一定程度上是有效的,但可能只是抑制性的,而不是杀支原体的,

 

怎么办?配制是个问题 ,浓度各个文献所述的也不太一样?

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