Western Blotting技术服务-蛋白相关服务 -技术服务-生物在线

产品名称： Western Blotting技术服务

英文名称： Western Blotting

产品编号： 05

产品价格： 1500/膜

产品产地： null

品牌商标： null

更新时间： null

使用范围： null

蒲若生物科技有限公司

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◇服务内容：

1、细胞/组织蛋白提取与定量；

2、对内参基因的western-blot检测；

3、对目的基因的western-blot检测；

4、通过胶片条带浓度分析目的基因在各样本中的表达差异；

◇质量保证：

我公司多年专业Western Blotting技术服务，我们保证对所售任何产品一概负责到底，每一份实验结果都真实可靠！

◇注意事项：

western blot中转移在膜上的蛋白处于变性状态，空间结构改变，因此那些识别空间表位的抗体不能用于western blot检测。这种情况可以将表达目的蛋白的细胞或细胞裂解液中的所有蛋白先生物素化，再用酶标记亲和素进行western blot。实验中取胶和膜需带手套。

◇具体操作：

1、蛋白质抽提；

2、蛋白质定量：按BCA蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度；

3、变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE):将准备好的样品液和预染蛋白marker分别上样，标准加进第一个孔中，电泳分离蛋白；

4、蛋白质转移到PVDF膜,按Bio-Rad蛋白转移装置说明组装滤纸凝胶纤维素夹层，30mA恒流条件下，4°C转移过夜；

5、western blot膜的封闭和抗体孵膜在5％脱脂奶粉溶液中室温孵育1小时以封闭膜上的非特异结合；

6、western blot结果检测；

7、western blot数据分析。