番红O固绿染色服务介绍 番红O固绿染色（软骨）在涉及关节软骨及软骨下骨的形态学研究中，常需要联合使用多种染料以显示其组织学结构。其 中，起源于上世纪60年代的番红O（safranin O）-固绿（fast green）染色因可以直观反映关节软骨、软骨下骨和骨组织的 结构而备受青睐。软骨呈红色，成骨呈绿色。 番红O固绿染色实验意义 番红O固绿染色染色是针对软骨及植物进行染色的方法，此方法简易，节约时间、用具器皿及药品，染色清晰。 实验步骤： 1.软骨染色步骤： ①骨组织固定、脱钙，制成石蜡切片。 ②切片常规脱蜡至水。 ③入新鲜配制的weigert染液染色。 ④流水冲洗。 ⑤酸性乙醇分化液分化。 ⑥蒸馏水洗。 ⑦在固绿染色液内浸染。 ⑧蒸馏水洗。 ⑨入番红O染液内浸染。 ⑩蒸馏水洗。 ⑪用乙酸溶液洗涤切片，以便去除残留的固绿，再用蒸馏水洗。 ⑫分别用95%乙醇、无水乙醇脱水。 ⑬二甲苯透明，中性树脂封固。 ⑭镜检。 2.植物染色步骤： ①标本的处理：固定，切成石蜡切片。 ②粘片。 ③脱蜡：二甲苯→50%二甲苯+50%乙醇→100%乙醇→95%乙醇→85%乙醇→70%乙醇→50%乙醇→30%乙醇→水。 ④入番红O染色液染色。 ⑤酸性乙醇分化液分化15s。 ⑥脱色：35%乙醇→50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇。 ⑦水洗1min。 ⑧入固绿染色液内浸染，蒸馏水洗1min。 ⑨无水乙醇脱水3-5min,无水乙醇脱水，50%二甲苯+50%乙醇透明5min,二甲苯5min。 ⑩树脂封固。

染色结果： （1）软骨染色结果： 软骨基质深红色；软骨细胞核蓝色；细胞浆、肌肉、胶原纤维及骨组织呈灰绿色。 （2）植物染色结果： 木质化、木栓化的细胞壁染成红色；纤维素细胞壁染成绿色；导管染成红色，筛管染成绿色。 实验技巧： （1）软骨染色： 固绿与胶原纤维结合，不宜褪色，番红o-固绿染色的分化很关键，分化过度容易导致切片不着色，分化不足易导致切片着色 过深。 （2）植物染色： 番红染色后，在50%乙醇中脱色需经实践，如果脱色不够绿色会不好染；脱色过度会导致红色过淡，甚至全部绿色。 番红O固绿染色样片参考：

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