蛋白酶K proteinase K

　　 蛋白酶k产品说明:冻干粉,无DNase和RNsse活性.4℃保存可存放2年以上.配置后的贮存液4℃保存可达1年之久.蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,对多种高分子量变性蛋白和天然蛋白有很强的蛋白水解活性.因为其可以快速对内切核酸酶的水解钝化作用而被常用于mRNA和高分子DNA的分离提取实验中.蛋白酶K能被DFP,Hg2+,和PMSF抑制,不能被金属螯合剂,巯基试剂,TLCK或TPCK活化

　　
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到。

　　蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到。据资料显示：该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以，蛋白酶k消化过程中通常加入edta(以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用)。但是，如果要消化对蛋白酶k具有较强耐性的蛋白，如角蛋白一类，则可能需要使用含有1mmol/l ca2+而不含edta的缓冲液。在消化完毕后、纯化核酸前要加入EGTA(ph8.0)至终浓度为2mmol/l,以鳌合ca2+。

　　蛋白酶K，是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定，还具有降解天然蛋白质的能力，因而它应用很广泛，包括制备脉冲电泳的染色体DNA，蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。

推荐反应缓冲液：50mMTris-HCl(pH7.5),10mM CaCl2 。

　　蛋白酶K配制标准：20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinase K)：将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。

保存：保存在-20℃冰箱里，避免反复冻融，有效保证12月。

孵育温度为55至65℃，理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。

蛋白酶K proteinase K

蛋白酶K proteinase K

蛋白酶K proteinase K