SSH(抑制性消减杂交)
产品名称: SSH(抑制性消减杂交)
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上海激活生物科技有限公司
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SSH是利用抑制性PCR能选择性指数扩增不同丰度差异基因和cDNA消减杂交建立起来的方法,运用了杂交二级动力学原理即高丰度序列退火时产生同源杂交的速度大于低丰度序列,使原本在丰度上有差异的DNA序列的相对含量趋于一致。然后利用抑制性PCR链内退火优于链间退火的特点,使两端接上同一接头的非目的基因片段,后者具有反向重复序列,因而在退火时易形成发卡状互补结构,在PCR中不能作为模板与引物配对扩增,从而达到选择性扩增目的基因而抑制非目的基因片段扩增的目的。消减杂交去除了试验组和对照组之间的同源序列,再结合抑制性PCR的动力学富集,能高效地分离出丰度较低的特异性非同源片段。
过程主要包括了cDNA的合成与酶切、接头连接、消减杂交和两次选择性PCR扩增。具有3.1 特异性高、、操作简单、假阳性率低
、高灵敏性、快速高效等优点。
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提供实验报告及构建于T载体的差异文库(涂布后的平板)。