SYBR i 核酸染料

产品描述：

SYBRGreen I是高灵敏的DNA荧光染料，适用于各种电泳分析，操作简单，无须脱色或冲洗：至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25-100倍。Super Green I与ds DNA结合荧光信号会增强800-1000倍，用SYBR Green I染色的凝胶样品荧光信号强，背景信号低，可用于多种电泳分析

SYBRGreen I适用于多种凝胶电泳法：琼脂糖凝胶，丙烯酰胺凝胶电泳，脉冲电场凝胶电泳和毛细管电泳等

SYBRGreen I与双链DNA亲和力非常高，可以用做电泳前染色，对分子生物学中常用的酶（如:Taq酶，逆转录酶，内切酶，T4连接酶等）没有抑制作用：另外，SYBR Green I与EB相比，诱变能力大大降低

电泳用IBS Green I使用方法简介：

SYBRGreen I预染色方法

1.该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳

2.工作液的配制：用电泳缓冲液将10000×的Super Green I稀释100倍，即为SYBR Green I工作液。SYBR Green I工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上

  3.制胶：按常规方法制胶，不含任何染料

  4.样品染色：向分析样品中加入SYBR Green I工作液和载样缓冲液，室温放置10分钟，使SYBRGreen I与样品中的DNA充分结合。SYBR Green I工作液加入量应为总上样量的1/10

5.DNA marker染色：5ul DNA marker和5ul DNA marker稀释液和1ul SYBR Green I工作液混匀，室温放置5分钟，使SYBR Green I与DNA充分结合

6.上样，电泳：按常规操作

SYBR Green I后染方法

1.按照常规方法进行电泳

2. 用PH 7.0-8.5的缓冲液（如TAE,TBE或者TE）,按照10000：1的比例稀释SYBR Green I浓缩液，混匀，制成染色溶液

3.将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温震荡染色10-30分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的工作溶液轻轻倒在胶板上，让工作液均匀的覆盖整个胶板，并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理（避免染料吸附在玻璃表面上）

荧光定量PCR用SYBR Green I使用方法简介

SYBR Green I与dsDNA结合荧光信号可增强800-1000倍。在PCR反应体系中，加入过量的SYBR Green I荧光染料，SYBR荧光染料特异性的掺入DNA双链后，荧光信号增强，而不掺入链中的SYBR Green I燃料分子荧光不变，从而保证荧光信号的增强与PCR产物增加完全同步。荧光可以在退火阶段或者延伸阶段测定

  使用浓度对荧光PCR 结果的影响

SYBR Green I荧光定量PCR试验成功有很多因素，但是SYBR Green I得使用浓度是非常关键的因素，如果SYBR Green I浓度过低会使荧光信号的变化降低。这就意味着低拷贝的样品可能无法检出；而在高浓度时，将会抑制PCR反应。降低PCR反应效率。所以一般在使用SYBR Green I时应根据实际情况优化使用浓度，反应终浓度为1×-0.2×之间。

  镁离子浓度的影响

  提高镁离子浓度可以降低SYBR Green I对PCR反应的抑制作用。建议在用SYBR Green I进行荧光PCR反应时，镁离子浓度要比SYBR  Green I的普通PCR反应要高出0.5-3Mm

储存条件：-20℃ ，避光保存