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Co-IP(免疫沉淀)

Co-IP(免疫沉淀)

商家询价

产品名称: Co-IP(免疫沉淀)

英文名称: Co-IP(免疫沉淀)

产品编号: L1003

产品价格: 3000

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使用范围: null

北京京雷科技发展有限公司
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Co-IP(免疫沉淀)

原理和过程:用一种抗体免疫沉淀富集蛋白质分子复合体,另外一种抗体检测另一个分子在免疫沉淀复合体内的表达,从而证实两个或多个分子之间是否存在相互作用。可以研究体外表达的重组蛋白分子之间、293细胞或Hela细胞过表达的分子之间、或内源性分子之间的相互作用。

样品:1. 客户需提供待检测样品、免疫沉淀用抗体及检测用抗体。

2.    免疫共沉淀(co-IP)通常使用未经冻存的新鲜蛋白样品。

收费标准:3000/实验,不包括一抗费用。

实验周期:2-3周提交实验报告

 

按照检测A分子和B分子的相互作用为例:

1. A分子和B分子的抗体,其中,至少一个能做IP,由客户按需提供。

2. 处理好的细胞,一般做IP需要800ug-1000ug的蛋白,也就是需要长得很满的10cm培养皿2个,或细胞稍微稀一点的10cm培养皿3个。

3. 收集细胞:以贴壁细胞为例,吸去培养基,8-10ml的冷PBS4度存放)洗2次培养皿,将细胞用细胞铲刮入1ml的冷PBS中,转入离心管,4度离心机,2500rpm离心5分钟,弃上清,留取细胞沉淀。-80度冻存。

4. 计费:先进行WB检测,如果蛋白表达量可以,抗体做WB好用,继续进行IP实验。如果蛋白表达较少,抗体不能进行WB,则收取WB费用(600/半张膜),不进行IP实验;如样品内AB分子表达较高,能进行IP实验,则不额外收取上述WB费用,IP实验收费为3000元。

5. IP实验成功判定标准为:使用IP抗体(A分子抗体),免疫沉淀得到了抗体识别的分子(A分子),不保证能够检测到相互作用分子(B分子)(因为影响相互作用的因素很多,甚至根本不相互作用);如果没有检测到相互作用分子(B分子),按照半价(1500元)收费。

 

技术项目

收费标准

1. 蛋白表达检测、相互作用检测

1.A. Western-blot检测

1200/膜,10个加样孔,检测8个样品

1.B. 免疫组化(IHC)检测

组织蜡块包埋(10/组织)、切片(10/载玻片)、

抗体检测(60/阳性片子)

1.C. Co-IP(免疫沉淀)

3000/实验

1.D. ELISA

800/96

2. 分子生物学实验

 

2.A. 原核、真核常规表达载体构建

2000/载体

2.B. 慢病毒表达载体构建、病毒包装

4000/载体构建+病毒包装

2.C. 慢病毒RNAi载体构建、病毒包装

4000/载体构建+病毒包装

2.D. 定点突变、片段删除突变

2000/定点突变,3000/片段删除

2.E. 质粒、基因组DNARNA大量提取

价格面议

3. 细胞系建立、细胞功能实验

 

3.A. 基因过表达稳定细胞系建立

4000/细胞系

3.B. 基因敲低稳定细胞系建立

4000/细胞系

3.C. CRISPR/Cas9系统基因敲除细胞系建立

20000/细胞系

3.D. 细胞增殖实验(MTS法)

800/两种细胞系比较

3.E. Transwell细胞迁移

200/well(小室)