PI 碘化丙啶(Propidium iodide)
产品名称: PI 碘化丙啶(Propidium iodide)
英文名称: PI (Propidium Iodide)
产品编号: 40711ES10
产品价格: 0
产品产地: 翌圣生物
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2024-12-10T11:28:44
使用范围: null
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产品信息
产品描述
碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种常用的细胞核荧光染料,作为一种溴化乙锭(EB)的类似物,能够嵌入碱基之间实现与DNA结合。这种结合没有或者几乎无序列倾向性,大约每4-5个DNA碱基对结合一个染料。PI也能与RNA结合,需要用核酸酶处理来区分DNA和RNA染色。水溶液中PI的最大激发/发射波长是493/636nm。一旦与核酸结合,荧光信号明显增强20-30倍,最大激发波长向红色波段迁移~30-40nm,最大发射波长向蓝色波段迁移~15nm,从而使其最大激发/发射波长变为535/617nm。PI的摩尔吸光系数相对比较低,但是其具有足够大的斯托克司频移来同时检测核酸DNA和荧光标记抗体,只需要使恰当的滤片。PI适用于荧光显微镜,共聚焦显微镜,流式细胞仪以及荧光计分析。
PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外,但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用这一特性,通常与Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用,同时对活细胞和死细胞染色和鉴定,用于细胞凋亡相关的研究。也可以用作多重荧光染色的复染剂,兼容于各种细胞标记技术,包括直接或者间接的荧光抗体检测,mRNA原位杂交,细胞结构特异性的荧光探针检测法以及组织染色。PI的单独染色也可以进行细胞周期的检测。
产品性质
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。4 oC避光保存,至少一年稳定。
使用方法
1. 储存液的配制
称取1mg PI粉末(M. Wt= 668.4),用1ml去离子水充分溶解后配置成1mg/ml(1.5 mM)的储存液。4 oC避光保存,至少6个月稳定。
2. 贴壁细胞复染步骤(荧光显微镜检测)
1) 样本准备:根据自身样本选择合适的步骤固定细胞。PI染色一般在其它染色完成后再进行。PI复染要求细胞经透化处理。
2) RNase酶处理:若样本使用多聚甲醛,甲醛或者戊二醛固定,则需要进行RNase处理。若样本用甲醇/醋酸或者丙酮固定,通常不需要此步操作。a,于2×SSC (0.3 M NaCl, 0.03 M sodium citrate, pH 7.0)溶液平衡样本;b,将本品置于含有100μg/mL DNase-free RNase的2×SSC溶液中37°C孵育20min;c,用2×SSC溶液清洗样本3次,每次1min。
3) 复染:a,于2×SSC (0.3 M NaCl, 0.03 M sodium citrate, pH 7.0)溶液平衡样本;b,直接用2X SSC稀释1mg/ml(1.5 mM)PI储存液 1:3000,得到500 nM的PI工作液。通常添加300μL染液足够用于一个盖玻片细胞制片。染色1-5min。c,2×SSC清洗几次,流尽多余的缓冲液后,加入抗淬灭剂封片(比如Yeasen,货号:36308ES08)。d,选择荧光显微镜的合适滤片进行观察。
3. 悬浮细胞复染步骤(流式细胞仪检测)
1) 样本准备:TUNEology 波长可调检测卡盒-->